摘要:目的 探讨胃促生长素(Ghrelin)与护骨素(OPG)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)在钙化发生过程中的调控机制。 方法 首先观察高脂高糖培养基中A7r5(主动脉平滑肌细胞)钙化过程中Ghrelin的变化情况,继之观察外源性Ghrelin干预后高脂高糖钙化培养基中A7r5中OPG、RANKL的表达变化。最后观察Ghrelin与OPG/RANKL在钙化发生过程中的调控机制。各组细胞均于培养14天后进行相关检测(Von Kossa染色、茜素红染色、细胞外钙沉积量测定、免疫组织化学染色、Western blot检测)。 结果 Von Kossa染色、茜素红染色及细胞外钙沉积量检测显示,高脂高糖及β-甘油磷酸盐模拟的糖尿病代谢紊乱环境下,A7r5钙沉积量显著增加了5.21倍。Ghrelin免疫组织化学染色及IPP6定量分析显示,随着钙化的形成与发展,Ghrelin表达明显下调。外源性Ghrelin 可上调OPG相对表达量6.25倍。相对于高脂高糖钙化组,anti-OPG组钙沉积量增加了1.33倍(P<0.05),RANKL组钙沉积量增加了1.59倍(P<0.05)；相对于anti-OPG组,anti-OPG+Ghrelin组钙沉积量下调了41.9%(P<0.05)；相对于RANKL组,RANKL+Ghrelin组钙沉积量下调了57.8%(P<0.05)。 结论 OPG/RANKL可介导Ghrelin调控A7r5主动脉平滑肌细胞钙化。

摘要:目的观察生长素对血管紧张素Ⅱ所致的脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响。方法采取不同浓度的血管紧张素Ⅱ(10-9~10-6mol/L)刺激脐静脉内皮细胞24 h,获取最佳浓度(10-6mol/L)后用此浓度的血管紧张素Ⅱ分别刺激脐静脉内皮细胞0、6、12和24 h,观察脐静脉内皮细胞的增殖和迁移;并观察生长素(10-9~10-6mol/L)预处理2 h后与10-6mol/L血管紧张素Ⅱ共同孵育24 h和10-6mol/L生长素预处理0、0.5、1和2 h后与10-6mol/L血管紧张素Ⅱ共同孵育24 h对脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响。加入丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶信号通路阻滞剂PD98059(25μmol/L)、生长激素促分泌素受体1 a阻断剂([Dys3]GHRP-6 25μmol/L)预处理人脐静脉内皮细胞,观察其对生长素影响血管紧张素Ⅱ诱导的内皮细胞增殖和迁移的作用。水溶性四氮唑8法测细胞增殖,Transwell小室测细胞迁移,免疫印迹法测细胞中细胞外信号调节激酶1/2、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达。结果血管紧张素Ⅱ呈浓度和时间依赖性促进内皮细胞迁移和增殖。生长素抑制血管紧张素Ⅱ引起的内皮细胞迁移和增殖呈浓度和时间依赖性。PD98059(25μmol/L)预处理可以抑制血管紧张素Ⅱ促内皮细胞增殖作用,[Dys3]GHRP-6(25μmol/L)预处理阻断生长素对内皮细胞迁移和增殖的抑制作用。生长素可减少磷酸化细胞外信号调节激酶1/2的表达。结论生长素可抑制血管紧张素Ⅱ诱导的内皮细胞增殖和迁移,其机制涉及细胞外信号调节激酶1/2途径。

摘要:目的观察代谢综合征患者生长素水平的变化以及与炎症因子和内皮舒张功能的关系。方法代谢综合征患者131例,正常对照者132例,RIA法测定受试者体内生长素水平,ELISA法测量受试者体内炎症因子水平,比较不同组别间生长素水平,并分析生长素与内皮舒张功能和炎症因子的相关性,以及影响生长素水平的因素。结果代谢综合征组生长素水平比正常对照组低(P><0.01),低四分位生长素水平患者内皮舒张功能较高四分位生长素水平患者差(P><0.01);低四分位生长素水平患者肿瘤坏死因子α、白细胞介素8和单核细胞趋化蛋白1浓度比高四分位生长素水平患者高(P><0.01)。相关分析显示,生长素与内皮舒张功能呈正相关,与炎症因子浓度成负相关。多元回归分析显示,对生长素影响最大的是甘油三酯,其次是收缩压,然后是年龄。结论代谢综合征患者体内生长素水平下降,与内皮舒张功能呈正相关,与炎症因子浓度呈负相关,生长素可能改善内皮功能,降低炎症因子,阻止代谢综合征的发展。

摘要:为探讨生长素调节血管钙化的可能机制,用肌肉注射维生素D3和口服尼古丁诱导大鼠血管钙化模型和β甘油磷酸盐诱导血管平滑肌细胞钙化模型,采用原子吸收分光光度法测定血管和细胞钙含量,磷酸苯二钠法测定碱性磷酸酶活性,4 5CaCl2 摄入测定钙沉积,逆转录—聚合酶链反应测定生长素、骨桥蛋白和内皮素mRNA表达水平,放射免疫分析方法测定血浆生长素和内皮素含量。结果表明,维生素D3和尼古丁明显诱导大鼠血管钙化,β磷酸甘油可诱导血管平滑肌细胞钙化。采用30和30 0nmol kg生长素治疗大鼠均可抑制血管钙化,且高剂量时效应强于低剂量,与钙化组相比较,血管组织钙化指标均下降并且差异有显著性,而骨桥蛋白mRNA的表达明显上调。10 - 8～10 - 6 mol L生长素呈浓度依赖性降低血管平滑肌细胞钙化指标,并上调骨桥蛋白mRNA表达。此外生长素明显下调血浆内皮素浓度及血管组织的内皮素表达,且高剂量生长素的效应更强。结果提示,生长素可能部分通过拮抗血浆和血管组织局部的内皮素系统效应而产生抑制血管组织和血管平滑肌细胞钙化的作用。